Анотація до роботи:

Брунь Л.В. “Репаративні властивості глюкозаміну та його похідних“Фармація”. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю – фармакологія. – Інститут фармакології та токсикології АМН України, Київ, 2004.

Дисертація присвячена вивченню репаративних властивостей аміноцукру
2-D-(+)-глюкозаміну та його похідних. Встановлено протизапальний, репаративний ефект та гостру токсичність декількох сполук, які за широтою терапевтичної дії перевищують диклофенак натрію та кислоту мефенамову. Визначена найбільш активна та менш токсична субстанція - глюкозиламонійна сіль етилового ефіру 4-карб-етоксіоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти (ОГА), яка рекомендована для розробки м’якої лікарської форми для зовнішнього використання у вигляді крему.

Встановлено, що 1 % крем ОГА виявляє більш виразну репаративну, протизапальну та антимікробну активність, ніж 3 % крем ОГА та препарати порівняння (мазі “Мефенат” та “Вундехіл”). При вивченні антибактеріальної активності субстанції та кремів ОГА встановлені антимікробні спектри, а також їх антимікотична активність.

Висока спорідненість препарату до клітинних мембран обумовлює його дерматопротекторні властивості. Механізм репаративної дії 1 % крему ОГА пов’язаний із підвищенням синтезу білка, РНК, ДНК, оксипроліну, мукопротеїнів, ГАГ та колагену у ранах експериментальних тварин. 1 % крем ОГА володіє репаративною, протизапальною та антимікробною активністю при відсутності алергізуючої та місцевоподразнюючої дії та рекомендується для лікування другої і третьої фази ранового процесу.

У дисертацїї наведено теоретичне узагальнення і нове рішення актуальної наукової задачі – пошуку нових засобів з репаративними властивостями. На основі найбільш активної та менш токсичної речовини глюкозиламонійної солі етилового ефіру 4-карбетоксіоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти розроблено 1 % крем репаративної та протизапальної дії.

1. З 21 досліджуваної сполуки (похідних глюкозаміну) 8 речовин виявили антиексудативну активність на моделі карагенінового набряку у мишей. Їх широта терапевтичної дії перевищує диклофенак натрію у 4,4-5,7 рази, кислоту мефенамову у 33,2-42,6 рази. У глюкозиламонійних солей фенілантранілових та дикарбонових кислот, які поєднують антиексудативну та антиальтеративну активність (ІІв, ІІк, IIIа), термін загоєння ран на моделі стандартної скарифікованої рани у щурів склав 15-16 діб, тоді як у групі, яку не лікували, 21-22 доби, при лікуванні диклофенаком натрію – 20-21 добу, кислотою мефенамовою – 17-18 діб.

Встановлено, що підвищення антиексудативної активності відзначається при положенні карбоксильної групи за нефенілантраніловим фрагментом в послідовності – 3'<4'2'.

2. Найбільш виразні протизапальні та репаративні властивості має глюкозиламонійна сіль етилового ефіру 4-карбетоксіоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти (ОГА – IIIа). При пероральному введенні білим мишам ЛД₅₀ = 3850 мг/кг, ЕД₅₀ = 15 мг/кг, а при нашкірному нанесенні білим щурам розчинів в концентрації від 1 % до 10 % не відмічалось ознак запалення та була відсутня шкірноподразнююча дія.

3. 1 % та 3 % креми ОГА на моделі стандартної скарифікованої рани у щурів за показниками репаративної активності, швидкістю та термінами загоєння ран не відрізняються між собою. Репаративна активність на моделі лінійної різаної рани при лікуванні 1 % кремом ОГА складає 80,3 % (р<0,05), 3 % кремом-60,8 % (р<0,05).

4. 1 % крем ОГА має виразні протизапальні властивості: на моделі термічного опіку у мишей на 58 % зменшує набряк у порівнянні з контрольною групою. Протизапальна активність цього крему у 1, 9 рази перевищує мазь “Мефенат” та у 3,1 рази мазь “Вундехіл” (р<0,05).

5. У дослідах in vitro на твердих поживних середовищах за методом дифузії в агар 1 % крем ОГА виявляє антимікробні властивості по відношенню до S. aureus (d=24 мм), P. aeruginosa (d=14 мм), S. pyogenes (d=12 мм), C. albicans (d=12-14 мм).

6. При поглибленому вивченні репаративної активності 1 % крему ОГА на моделі повношарової “вирізаної” рани у морських свинок встановлено позитивний вплив ІІ та ІІІ фракцій ГАГ на загоювання, що приводить до утворення ніжно-волокнистого та косметичного рубця шкіри.

7. Механізм репаративних властивостей 1 % крему ОГА обумовлений підвищенням синтезу РНК, ДНК, білка, оксипроліну, ГАГ, колагену та мукопротеїнів у рані.

8. 1 % крем ОГА не викликає гіперемії та інфільтрації на шкірі, не змінює температуру шкіри, товщину шкірної складки, не підвищує кількість лейкоцитів у крові за методом нашкірних аплікацій, у тесті непрямої дегрануляції тучних клітин, на моделі шкірної анафілаксії не виявляє алергізуючої дії та не має місцевоподразнюючих властивостей (“кон'юнктивальна проба”).

9. 1 % крем ОГА, що має репаративну та протизапальну дію, ефективний у лікуванні ран різного генезу, запальних процесів шкіри і в цьому відношенні перевищує мазь “Мефенат” та мазь “Вундехіл”.

Публікації автора:

1. Зупанець І.А., Ісаєв С.Г., Ярьоменко В.Д., Павлій О.І., Семенов А.М., Місюрьова С.В., Пропіснова В.В, Брунь Л.В. Фармакологічна активність Д -(+)-глікозил-амонієвих солей заміщених бензойної кислоти / Актуальні питання медичної та фар-мацевтичної науки та практики: Зб. наук. статей, випуск VІІ. - Запоріжжя: ЗДМУ. - 2001. - С. 29-33; (особисто здобувачем проведено огляд літератури, експериментальні дослідження, статистична обробка даних, підготовка статті).

2. Бездетко Н.В., Брунь Л.В., Дедух Н.В., Павлий А.И., Исаев С.Г., Отришко И.А. Применение аминосахара глюкозамина и его производного оксаглюкамина в качестве репаративного средства / Лекарства – человеку: Сб. науч. статей. – Х. – 2001. – Т. XVІ, № 1-2. – С. 64-69; (особисто здобувачем проведено огляд літератури, експериментальні дослідження, статистична обробка даних, підготовка статті).

3. Павлій О.О., Брунь Л.В., Ісаєв С.Г., Зупанець І.А. D-(+)-глюкозиламонієві солі N-фенілантранілових кислот, їх синтез та біологічна активність // Медична хімія. - 2002. - Т. VІ, № 3.- С. 43-46; (особисто здобувачем проведено огляд літератури, експериментальні дослідження, статистична обробка даних, підготовка статті).

4. Зупанец И.А., Брунь Л.В., Ляпунов Н.А., Павлий А.И. Фармакологическое изучение кремов глюкозиламмонийной соли этилового эфира 4-карбэтоксиоксани-лоилгидразида щавелевой кислоты // Вісник фармації. - 2002. – №2 (30). - С. 114-116; (особисто здобувачем проведено огляд літератури, експериментальні дослідження, статистична обробка даних, підготовка статті).

5. Брунь Л.В., Ляпунов М.О., Павлій О.І. Фармакологічний скринінг кремів похідного аміноцукру глюкозаміну - глюкозиламонійної солі етилового ефіру
4-карбетоксіоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти // Клінічна фармація. - 2002. -
Т. 6, №4. - С. 52-56; (особисто здобувачем проведено огляд літератури, експериментальні дослідження, статистична обробка даних, підготовка статті).

6. Брунь Л.В., Зупанець І.А., Ісаєв С.Г., Павлій О.О. Експериментальне вивчення взаємозв’язку протизапальних і репаративних властивостей N-фенілантрані-лових кислот та похідних глюкозаміну // Фізіологічно активні речовини. - 2002. - №2 (34). - С. 65-69; (особисто здобувачем проведено огляд літератури, експериментальні дослідження, статистична обробка даних, підготовка статті).

7. Пат. 55973 А України, МПК 7 С07С205/00, А61К31/195. D-(+)-глюкозила-монієва сіль 4-хлор-N-(4'-карбоксифеніл) антранілової кислоти, яка проявляє протизапальну, анальгетичну активність / О.О. Павлій, Л.В. Брунь, С.Г. Ісаєв, І.А. Зупанець, Л.В. Яковлєва; Національний фармацевтичний університет (Україна). -
№ 2002086539; Заявл.: 06.08.02; Опубл.: 15.04.03; Бюл. № 4. - 4 с.; (особисто здобувачем проведено патентний пошук, експериментальні дослідження, статистична обробка даних).

8. Пат. 56772 А України, МПК 7 С07С 229/58, А61К 31/165. 4-Хлор-N-(2'-карбоксифеніл) антранілова кислота, яка проявляє протизапальну, анальгетичну активність / С.Г. Ісаєв, І.А. Зупанець, Л.В. Брунь, О.О. Павлій, О.І. Павлій, В.А. Ханін; Національний фармацевтичний університет (Україна). - №2002097206; Заявл.: 05.09.02; Опубл.: 15.05.03; Бюл. № 5. - 4 с.; (особисто здобувачем проведено патентний пошук, експериментальні дослідження, статистична обробка даних).

9. Пат. 62088 А України, МПК 7 С07С229/58, А61К31/165. D-(+)-глюкозила-монієва сіль 5-бром-N-(2'-карбоксифеніл) антранілової кислоти, яка проявляє протизапальну, анальгетичну активність / С.Г. Ісаєв, І.А. Зупанець, Л.В. Брунь, О.О. Павлій, О.І. Павлій, Л.В. Яковлєва, В.А. Ханін, Г.В. Зайченко, К.О. Іванова; Національний фармацевтичний університет (Україна). - № 2002108094; Заявл.: 11.10.02; Опубл.: 15.12.03; Бюл. № 12. - 4 с.; (особисто здобувачем проведено патентний пошук, експериментальні дослідження, статистична обробка даних).

10. Пат. 57492 А України, МПК 7 С07С 229/58, А61К 31/165. Нітро- та хлорзаміщені N-(карбоксифеніл) антранілової кислоти, що проявляють протизапальну, репаративну та анальгетичну активність / І.А. Зупанець, С.Г. Ісаєв, Л.В. Брунь,
О.О. Павлій, О.І. Павлій; Національний фармацевтичний університет (Україна). -
№ 2002108649; Заявл.: 31.10.02; Опубл. 16.06.03; Бюл. № 6. - 4 с.; (особисто здобувачем проведено патентний пошук, експериментальні дослідження, статистична обробка даних).

11. Пат. 62112 А України, МПК 7 С07С 229/58, А61К 31/165. D-(+)-глюкозила-монієва сіль 5-нітро-N-(4'-карбоксифеніл) антранілової кислоти, яка проявляє протизапальну, репаративну та анальгетичну активність / Л.В. Брунь, І.А. Зупанець,
С.Г. Ісаєв, О.О. Павлій, В.А. Ханін; Національний фармацевтичний університет (Україна). - № 2002119152; Заявл.: 18.11.02; Опубл. 15.12.03; Бюл. № 12. - 6 с.; (особисто здобувачем проведено патентний пошук, експериментальні дослідження, статистична обробка даних).

12. Ісаєв С.Г., Зупанець І.А., Павлій О.О., Брунь Л.В. Синтез нітро-
N-фенілантранілових кислот у твердій фазі та їх біологічна активність // Вісник фармації. - 2001. – №3 (28). - С. 44-45.

13. Зупанець І.А., Брунь Л.В. Використання похідних глюкозаміну у якості репаративних засобів // Клінічна фармація. - 2000. – Т. 4, №4. - С. 75.

14. Зупанец И.А., Брунь Л.В. Андреева Е.А. Регуляция метаболизма репаративной регенерации при местном применении производного аминосахара глюкозамина 4-карбэтоксиоксанилоилгидразида щавелевой кислоты // Вісник Вінницького державного медичного університету. - 2002. – Т. 6, №1. - С. 167-168.

15. Зупанець І.А., Брунь Л.В. Експериментальне вивчення крему напівсинтетичного похідного аміноцукру глюкозаміну і щавлевої кислоти / Здобутки клінічної та експериментальної медицини: Зб. наук. праць XLV Міжрегіональної (підсумкової) науково-практичної конференції, Тернопіль, 2002 – С. 129-130.

16. Зупанець І.А., Павлій О.І., Брунь Л.В. Перспективи створення мазі репаративної дії на основі похідних глюкозаміну: Тези доповідей VIII Конгресу Світової Федерації українських лікарських товариств. – Лівів, 2000. – С.447.

17. Зупанець І.А., Брунь Л.В. Вивчення репаративної активності м’якої лікарської форми похідного аміноцукру глюкозаміну-4-карбетоксіоксанілоїлгідразиду щавлевої кислоти: Тези доповідей IX Конгресу СФУЛТ. – Луганськ, 2002. – С. 461.

18. Брунь Л.В. Використання крему оксаглюкаміну у хірургічній практиці: Тези доповідей Всеукраїнськ. наук.-практ. конф. “Фармація XXI століття”. - Х.: НФаУ “Золоті сторінки”. - 2002. - С.132-133.

19. Зупанець І.А., Брунь Л.В., Ляпунов М.О., Павлій О.І. Вивчення вмісту фракцій глікозаміногліканів у сироватці крові морських свинок з повношаровими “вирізаними” ранами при лікуванні 1% кремом оксаглюкаміну: Тези доповідей III Міжнародної науково-практичній конференції “Наука і соціальні проблеми суспільства: медицина, фармація, біотехнологія”. - Х.: Видавництво НФаУ, 2003. - С. 131.

20. Ісаєв С.Г., Павлій О.О., Зупанець І.А., Брунь Л.В., Павлій О.І. Оптимізація пошуку ефективних лікарських засобів на основі N-фенілантранілових кислот: Інформаційний лист № 193-2003. – К., 2003. – Вип. №13 за РПК “Фармація”. – 4 с.; (особисто здобувачем проведено огляд літератури, експериментальні дослідження, статистична обробка даних, підготовлено матеріал до Укрпатентінформу).